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  • 張靈旺 Robin Chang

螢光光譜儀測量

 

螢光測量在許多生物學(葉綠素和類胡蘿蔔素)、生物醫學(螢光病變診斷)和環境科學應用中是非常必要的一種手段。螢光測量通常需要高靈敏度的光譜儀(推薦AvaSpec-2048TEC,積分時間 > 5 seconds).對於大多數螢光應用來說,產生的螢光能量只占激發光能量的3%左右。螢光能量比激發光能量要小(所以波長要長),而且一般都是散射光(在各個方向上輻射能量)。

對於螢光光譜儀裝置來說最重要一點是防止激發光進入光譜儀,這可以通過不同方法實現,各種方法不互相排斥:

1. 使用AvaLight-LED作為激發光源(窄帶寬),激發光波長不在螢光光譜範圍內。 

  

 

2. 使用(干涉)帶通或低通濾光片與AvaLight-HAL光源一起得到高強度窄帶寬的激發光。

3. 確保激發光與螢光是90度正交的,這樣激發光不會進入接收光纖(使用CUV-UV/VIS-FLCUV-DA)。

4. 利用螢光的延遲時間把激發光和螢光積分時間起始脈衝分離開。此時需要一個脈衝光源(脈衝雷射器或XE-2000閃光氙燈)AvaSpec-2048FT快觸發光譜儀(可編程式控制制延遲時間)。

典型的螢光測量系統如圖所示。

 

螢光光譜儀測量常用配置

 

光譜儀

AvaSpec-2048光譜儀(可選-FT-TEC型)

VA光柵(360-1100nm),200微米狹縫,DCL-UV/VIS靈敏度增強透鏡

軟體

AvaSoft-Full軟體

光源

AvaLight-LED475AvaLight-HAL鹵素光源(帶CUV-HAL試管支架和干涉濾光片)

光纖探頭

1FCR-UV200/600-2-IND螢光光纖(帶FCR-FLTIP-IND頭)

2FC-UV600-2光纖

附件

CUV-DACUV-HALCUV-FL-UV/VIS試管支架